腎上腺素酶聯(lián)診斷試劑盒使用雙抗體夾心法測定標(biāo)本中人甲氧基去甲腎上腺素(MNA)水平。用純化的人甲氧基去甲腎上腺素(MNA)抗體包被微孔板，制成固相抗體，往包被單抗的微孔中順次參加甲氧基去甲腎上腺素(MNA)，再與HRP標(biāo)記的甲氧基去甲腎上腺素(MNA)抗體結(jié)合，構(gòu)成抗體-抗原-酶標(biāo)抗體復(fù)合物，通過洗刷后加底物TMB顯色。

 

　　TMB在HRP酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色，并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成黃色。顏色的深淺和樣品中的甲氧基去甲腎上腺素(MNA)呈正相關(guān)。用酶標(biāo)儀在450nm波長下測定吸光度（OD值），通過標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算樣品中人甲氧基去甲腎上腺素(MNA)含量。

 

　　腎上腺素樣本處理及要求：

 

　　1.血清：室溫血液自然凝結(jié)10-20分鐘，離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。細(xì)心搜集上清，保存過程中如呈現(xiàn)沉淀，應(yīng)再次離心。

 

　　2.血漿：應(yīng)根據(jù)標(biāo)本的要求選擇EDTA或檸檬酸鈉作為抗凝劑，混合10-20分鐘后，離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。細(xì)心搜集上清，保存過程中如有沉淀構(gòu)成，應(yīng)該再次離心。

 

　　3.尿液：用無菌管搜集，離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。細(xì)心搜集上清，保存過程中如有沉淀構(gòu)成，應(yīng)再次離心。胸腹水、腦脊液參照實(shí)行。

 

　　4.細(xì)胞培養(yǎng)上清：檢測分泌性的成份時(shí)，用無菌管搜集。離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。細(xì)心搜集上清。檢測細(xì)胞內(nèi)的成份時(shí)，用PBS（PH7.2-7.4）稀釋細(xì)胞懸液，細(xì)胞濃度達(dá)到100萬/ml左右。通過重復(fù)凍融，以使細(xì)胞破壞并放出細(xì)胞內(nèi)成份。離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。細(xì)心搜集上清。保存過程中如有沉淀構(gòu)成，應(yīng)再次離心。

 

　　5.組織標(biāo)本：切開標(biāo)本后，稱取重量。參加一定量的PBS，PH7.4。用液氮敏捷冷凍保存?zhèn)溆?。?biāo)本消融后依然保持2-8℃的溫度。參加一定量的PBS（PH7.4），用手工或勻漿器將標(biāo)本勻漿充分。離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。細(xì)心搜集上清。分裝后一份待檢測，其余冷凍備用。

 

　　6.標(biāo)本采集后盡早進(jìn)行提取，提取按相關(guān)文獻(xiàn)進(jìn)行，提取后應(yīng)盡快進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。若不能立刻進(jìn)行試驗(yàn)，可將標(biāo)本放于-20℃保存，但應(yīng)避免重復(fù)凍融.

 

　　7.不能檢測含NaN3的樣品，因NaN3辣根過氧化物酶的（HRP）活性。