人半乳糖凝集素3檢測試劑盒（ELISA法）

產品詳情

預期用途
人半乳糖凝集素3檢測試劑盒可用于人血清，血漿或細胞培養上清液中半乳糖凝集素3的定量檢測。僅用于科研使用。

檢測原理

人半乳糖凝集素3ELISA檢測試劑盒，使用包被有人Galectin-3特異性抗體的96孔板。將標準品和樣品加入到孔中，樣品中存在的Galectin-3通過固定的抗體與板孔結合。洗滌板孔并加入生物素化的抗人Galectin-3抗體， 洗去未結合的生物素化抗體后，將HRP-綴合的鏈霉抗生物素蛋白加入到孔中。再次沖洗板孔，向孔中加入TMB底物溶液，其與所結合的Galectin-3的量成比例地顯色。 終止液將溶液顏色從藍色變為黃色，并且在450nm處測量吸光度。

人半乳糖凝集素3檢測試劑盒組成成分

實驗所需材料（未提供）
1.能夠測量450 nm處吸光度的酶標儀。
2.提供2μl至1 ml體積的精密移液管。
3.可調1-25毫升移液器用于試劑制備。
4．100毫升和1升刻度量筒。
5. 吸水紙。
6. 蒸餾水或去離子水。
7.雙對數做圖紙或計算機和軟件進行ELISA數據分析。
8.準備標準品或樣品稀釋液的管子。

試劑盒檢測步驟
1、使用前將人半乳糖凝集素3ELISA檢測試劑盒和樣品置于室溫（18 - 25oC）。建議所有標準和樣品至少重復一次。
2、根據您的實驗標記可拆卸的8孔條。
3、分別加入樣品和每個標準品100μl（參見試劑制備步驟3）到適當的板孔中。蓋上蓋子，室溫溫和振蕩孵育2.5小時
4、棄去溶液，用1X洗滌液洗滌4次。使用多通道移液器或自動洗板機洗板，每孔加入洗滌緩沖液（300μl）。每個步驟中去除液體對于良好的性能是至關重要的。洗完后，通過吸取或傾析清除任何剩余的洗滌緩沖液。倒置板并用干凈的吸水紙吸干印跡。
5、每孔加入100μl1X制備的生物素化抗體（試劑制備步驟6）。在室溫下溫和振蕩孵育1小時。
6、棄去溶液。重復洗滌，如步驟4。
7、加入100μl制備的鏈霉親和素溶液（見試劑制備步驟7）。在室溫下溫和搖動孵育45分鐘。
8、棄去溶液。 重復洗滌，如步驟4。
9、向每個孔中加入100μlTMB一步底物試劑（項目H）。在室溫下在黑暗中輕輕振蕩孵育30分鐘。
10、向每個孔中加入50μl終止液（項目I）。 立即讀取450 nm處吸光度值。

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