促紅細(xì)胞生成素EPO檢測(cè) ELISA試劑盒，酶聯(lián)免疫進(jìn)口試劑盒，科潤(rùn)達(dá)生物代理

【產(chǎn)品名稱】

通用名稱：促紅細(xì)胞生成素檢測(cè)試劑盒（酶聯(lián)免疫法）

英文名稱：Erythropoietin ELISA

【產(chǎn)品規(guī)格】

96T

【預(yù)期用途】

促紅細(xì)胞生成素EPO檢測(cè) ELISA試劑盒NM56011可用于定量檢測(cè)人血清中的促紅細(xì)胞生成素（EPO）。本實(shí)驗(yàn)旨在用于檢測(cè)人血清中EPO水平的升高或降低，以輔助診斷貧血和紅細(xì)胞增多癥。

【檢測(cè)原理】

本試劑盒是一種兩點(diǎn)ELISA，用于測(cè)量EPO的生物活性165個(gè)氨基酸鏈。它利用了抗人EPO的兩種不同的小鼠單克隆抗體，這些抗體對(duì)EPO分子上的明確區(qū)域具有特異性。一種抗人EPO的小鼠單克隆抗體被生物素化，另一種抗人EPO的小鼠單克隆抗體用辣根過(guò)氧化物酶[HRP]標(biāo)記以進(jìn)行檢測(cè)。

鏈霉親和素孔 – 生物素化抗EPO抗體（小鼠單克隆）– EPO – HRP結(jié)合的抗EPO抗體（小鼠單克隆）。

在該測(cè)定中，將標(biāo)準(zhǔn)品，質(zhì)控或患者樣品與酶標(biāo)記的抗體和生物素結(jié)合的抗體同時(shí)在鏈霉親和素包被的微孔板中孵育。在測(cè)定溫育結(jié)束時(shí)，洗滌微孔以除去未結(jié)合的組分，并且將與固相結(jié)合的酶與底物四甲基聯(lián)苯胺（TMB）一起溫育。然后加入酸性終止液以終止反應(yīng)并將顏色轉(zhuǎn)變?yōu)辄S色。黃色的強(qiáng)度與樣品中EPO的濃度成正比。使用從標(biāo)準(zhǔn)品獲得的結(jié)果，生成吸光度單位與濃度的劑量響應(yīng)曲線。直接從該曲線確定質(zhì)控和患者樣品中存在的EPO濃度。該標(biāo)準(zhǔn)已針對(duì)由重組DNA衍生的EPO組成的世界衛(wèi)生組織（WHO）促紅細(xì)胞生成素國(guó)際標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行了標(biāo)準(zhǔn)。所用的WHO參考標(biāo)準(zhǔn)是促紅細(xì)胞生成素1國(guó)際標(biāo)準(zhǔn)（87/684）。

【樣品收集與儲(chǔ)存】

EPO的測(cè)定應(yīng)在人血清中進(jìn)行。為了一式兩份地分析樣品，需要400 µL的人血清。強(qiáng)烈建議在上午7:30至中午12:00之間采集標(biāo)本，因?yàn)槲墨I(xiàn)中報(bào)道了促紅細(xì)胞生成素的晝夜變化。如果可能的話，在不使用抗凝劑的情況下采集全血，并使血液在2-8°C之間凝結(jié)。據(jù)報(bào)道，在室溫（22°C至28°C）下凝結(jié)的血清樣品導(dǎo)致的EPO值比冰上的凝結(jié)法降低了約30％，這是通過(guò)放射免疫測(cè)定法得出的。然后應(yīng)迅速分離血清，最好是在冷藏離心機(jī)中，并保存在-15°C或更低的溫度下。血清樣品可在2-8°C下最多保存24小時(shí)。在-15°C冷凍的血清樣本可穩(wěn)定長(zhǎng)達(dá)12個(gè)月。請(qǐng)勿將樣品存放在自解凍的冰柜中。避免反復(fù)冷凍和解凍樣品。為了長(zhǎng)期保存樣品，建議在冷凍前將樣品等分到樣品管或小瓶中。使用前，讓所有樣品恢復(fù)到室溫（22°C至28°C）并通過(guò)輕輕顛倒或旋轉(zhuǎn)混合。避免嚴(yán)重溶血或脂血樣品。

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