載脂蛋白α檢測(cè)試劑盒（脂代謝），ELISA法進(jìn)口試劑盒，英文名：Human ApoA5 Assay Kit - IBL

產(chǎn)品規(guī)格

96T

產(chǎn)品預(yù)期用途

本產(chǎn)品僅供科研用，不用于臨床診斷。

檢測(cè)原理

該試劑盒是固相夾心ELISA（酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定）。當(dāng)將第一抗體包被在平板上時(shí)，將樣品和標(biāo)準(zhǔn)品加入到板孔中進(jìn)行第一次反應(yīng)。 反應(yīng)后，加入HRP-綴合的二抗進(jìn)入板孔進(jìn)行第二次反應(yīng)。 沖洗掉未結(jié)合的二抗后，將四甲基聯(lián)苯胺（TMB）加入孔中并顯色。

檢測(cè)樣本

人血清和EDTA-血漿

儲(chǔ)存條件

2-8℃保存，有效期見試劑盒外包裝

試劑盒成分

1  預(yù)包被板:  抗人ApoA5（53A2）鼠單克隆抗體            96T x 1

2  酶標(biāo)記抗體:

   (30倍濃縮)HRP標(biāo)記抗人ApoA5(63A2)  小鼠IgG Fab’）   0.4mL x 1

3  標(biāo)準(zhǔn)品:             重組人ApoA5                       0.5mL x 2      

4  EIA緩沖液:                           30mL x 1

5  標(biāo)記抗體稀釋液:                       12mL x 1

6  顯色劑:   15mL x 1

7  終止液:   12mL x 1

8  濃縮洗滌液:                                 50mL x 1

實(shí)驗(yàn)操作步驟

準(zhǔn)備

1) 洗滌液的準(zhǔn)備

試劑盒的洗滌液是一種40倍濃縮液,應(yīng)稀釋為1X洗滌液進(jìn)行洗板用。使用前平衡至室溫并混勻，根據(jù)需要量進(jìn)行配置。

2）酶標(biāo)記抗體的準(zhǔn)備

試劑盒中的標(biāo)記抗體是一種30倍濃縮物,根據(jù)所需量用標(biāo)記抗體稀釋液稀釋.稀釋后的標(biāo)記抗體才能用于檢測(cè)步驟。

示例:

如果你用一條板(8孔),就需800μL.的標(biāo)記抗體。用870 μL的標(biāo)記抗體稀釋液稀釋30  μL濃縮液,充分混勻.并每孔各加100 μL此步操作需要酶標(biāo)記物加入之前才能進(jìn)行

剩余的濃縮標(biāo)記抗體液需密封瓶裝,存于4°C

2) 標(biāo)準(zhǔn)品的準(zhǔn)備

加0.5 mL的EIA緩沖液到瓶裝標(biāo)準(zhǔn)品中充分溶解,制成40ng/mL. 的標(biāo)準(zhǔn)品液，該溶解后的標(biāo)準(zhǔn)品可以冷凍保存，但應(yīng)避免反復(fù)凍融。

標(biāo)準(zhǔn)品的稀釋

準(zhǔn)備7支試管,并每支各加230 μL  EIA緩沖液.

將40ng/mL的標(biāo)準(zhǔn)品230ul加入到試管-1中混勻，制成20ng/mL的標(biāo)準(zhǔn)品，再取20ng/mL的標(biāo)準(zhǔn)品230ul到試管-2中混勻，制成10ng/mL的標(biāo)準(zhǔn)品，以此類推，做2倍倍比稀釋，制成20-0.31ng/mL的標(biāo)準(zhǔn)品系列。

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