副流感病毒IgG/IgM ELISA檢測試劑盒

【產品名稱】

通用名稱：副流感1/2/3 IgG ELISA試劑盒

英文名稱： Parainfluenza 1/2/3 IgG ELISA

【產品規格】

96T

【預期用途】

副流感病毒IgG抗體檢測試劑盒，此酶免試劑盒可用于人血清中抗副流感病毒1/2/3 IgG抗體的體外定性和定量檢測。

【前言簡介】

副流感病毒感染是一種通過空氣傳播并在各個地域都會出現的傳染病。副流感病毒在1歲大嬰兒中的血清學流行率為50%。副流感病毒的典型特征是頻繁的再感染,副流感病毒3的主要特征為：其潛伏期為2-6天。副流感病毒是副粘病毒的一個亞種。它和呼吸道合胞病毒(RSV)一起屬于呼吸道疾病的主要病毒性病原體，并且這種呼吸道感染會伴隨有嚴重的臨床癥狀。在成年人中，副流感病毒會引起嚴重的鼻咽炎。副流感病毒感染開始的癥狀表現為突然間的頭疼、肌肉疼痛和關節痛，接下來就出現38-39°C的高燒。如果下感染了下呼吸道，則又會出現氣管支氣管炎的癥狀：聲音嘶啞和干咳。在新生兒中，副流感病毒1會引起嚴重的肺炎，主要表現為高燒、黃萎病、呼吸困難和膿血痰。有時候還會出現腦膜炎的癥狀。在嬰兒和兒童中，副流感病毒2經常會引起急性喉氣管支氣管炎和假格魯布。它首先表現為鼻黏膜炎的癥狀，之后出現呼吸困難、干咳和呼吸急促。副流感病毒3被認為是引起肺炎和細支氣管炎的主要病原體。副流感病毒1/2/3分布于全球各個地方都存在，而副流感病毒4僅出現在美國。流感病毒1和流感病3的感染一年四季都會出現，而流感2和4的感染只是偶爾出現。副流感病毒的實驗室檢測方法有血細胞凝集檢測、補體結合實驗和中和實驗。新方法有IFA和ELISA，它們可以鑒別出病人血清中的IgG和IgA抗體。在鑒別診斷中，由于交叉反應，我們必須進行麻疹病毒、船運熱病毒和猿病毒5等副粘病毒的檢測。

【檢測原理】

副流感病毒IgG抗體檢測試劑盒，此固相ELISA試劑盒利用的夾心法原理。包被板上包被了抗原。用對人IgG具有特異性的酶標二抗來檢測結合到包被抗原的樣品特異性抗體。底物反應后，所顯示的顏色強度與檢測到的IgG特異性抗體的量成正比。樣品的結果可直接使用標準曲線得。

實驗步驟

1) 加100µL標準品和已稀釋樣本于相應反應孔中，在定性檢測中只使用標準品B。

2) 封板后室溫（18℃-25℃）溫育60分鐘。

3) 移去粘性金屬板，棄去孔中液體。用300µL洗滌液洗板3次，在吸水紙上拍干。

4) 在每一微孔中加入100µL酶聯物。

5) 封板后室溫（18℃-25℃）溫育30分鐘。

6) 移去粘性金屬板，棄去孔中液體。用300µL洗滌液洗板3次，在吸水紙上拍干。加底物液和終止液時，如果有條件的話，可使用8孔微量移液器。確保底物液和終止液都是相同的時間間隔加入。使用確切容積并避免氣泡產生。

7) 每孔加TMB底物液100µL。

8) 室溫（18℃-25℃）避光溫育20分鐘。

9) 在每一微孔中加入100µL TMB終止液以終止底物反應。輕輕搖動包被板以使試劑混合均勻。此時，顏色藍色變成黃色。

10) 加終止液后60分鐘內在450nm處測OD值。

【結果計算】

在半對數坐標紙上或用自動生成的方法，以標準品的OD值為Y軸，濃度為X軸，繪制一標準曲線圖。用立體圖、4參數對數圖或對數-對數圖都可獲得良好的實驗結果。對于標準曲線圖，用標準品的每一單值進行計算（樣品結果明顯異常的值必須刪除掉，應使用更加合理的單值）。樣品的濃度可直接從標準曲線上獲得。一旦樣品稀釋了，就應當乘以相應的稀釋因子。如果樣品所測得的濃度高于最高標準，則應根據實驗前的準備說明所述對樣品進行稀釋，并重新檢測。

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