大鼠GRO/CINC-1檢測試劑盒

【預期用途】

此試劑盒可用于定量檢測大鼠血清、EDTA-血漿和細胞上清液中的GRO/CINC-1。重組和天然形式GRO/CINC-1均可檢測。本產品僅用于研究，不用于診斷。

【前言簡介】

細胞因子誘導的中性粒細胞趨化劑-1（CINC-1）最初是從IL-1β刺激的大鼠腎上皮樣細胞（NRK-52E）條件下的培養基中純化的。渡邊富山醫學和制藥大學的研究小組在1989年確定了編碼大鼠CINC-1的氨基酸序列。CINC-1是趨化因子的α（CXC）亞家族中的一員。另外三種大鼠CXC趨化因子（CINC-2α，CINC-2β，CINC-3/MIP-2）已被鑒定出來。CINC-1的蛋白序列與CINC-2α、CINC-2β、CINC-3/MIP-2的蛋白序列同源性為63 - 67%。此外，GROα、GROβ和GROγ與CINC-1的一致性分別為68%、71%和69%。這已經表明，CINCs是人類GROs的大鼠對應物。

【檢測原理】

大鼠GRO/CINC-1檢測試劑盒基于固相夾心法原理，利用兩種高特異性抗體進行檢測。四甲基聯苯胺（TMB）作為一種顯色原，顯色強度與大鼠GRO/CINC-1的量成正比。

【試劑盒組分】

1）微孔板：            96孔，包被抗大鼠GRO/CINC-1兔IgG親和純化

2）標記抗體：          30倍濃縮，1x0.4ml，HRP-抗大鼠GRO/CINC-1兔IgG Fab’親和純化

3）標準品：            2x0.5ml，重組大鼠GRO/CINC-1

4）EIA緩沖液：        1x30ml

5）標記抗體溶液：      1x12ml

6）底物液：            1x15ml

7）終止液：            1x12ml

8）洗滌緩沖濃縮液：    1x50ml，40倍濃縮

【儲存】

試劑盒應儲存于2-8℃中，其有效期在試劑盒上注明，不要使用過期試劑。

【試劑制備】

（1）洗滌緩沖液

使用前平衡至室溫，并輕輕混合均勻

50mL洗滌緩沖濃縮液+1950mL蒸餾水，混合均勻，得到洗滌緩沖液工作液，稀釋后的洗滌緩沖液在冰箱中可儲存2周

（2）標記抗體

在一次性試管中用標記抗體溶液30倍稀釋標記抗體濃縮液，若使用1條微孔板（8孔），需要800μL標記抗體，即30μL標記抗體濃縮液+870μL標記抗體溶液，混合均勻

僅在使用前進行制備，標記抗體濃縮液應在4℃下密封儲存

（3）標準品

向標準品中加入0.5mL蒸餾水使其溶解，得到的標準品濃度為600pg/mL。

準備8支試管并向每支試管中加入230μL EIA緩沖液

將230μL重建后的標準品加入試管1中，輕輕混勻；將230μL試管1中溶液加入試管2中，混合均勻。連續2倍稀釋制備7個標準品濃度，范圍為300 - 4.69pg/mL，試管8濃度為0pg/mL，作為樣本空白